为了解鹦鹉禽多瘤病毒(APV)陕西分离株(SX-2018株)VP1基因的分子特征,并建立可用于临床的
快速灵敏的 APV 检测方法,本研究通过 PCR 扩增了 SX-2018 株 VP1 基因序列,并与 22 株国内外参考株进行了核
苷酸同源性比较和遗传进化分析。结果显示:扩增的 SX-2018 株 VP1 基因全长为 1 032 bp,与其他 APV 分离株核
苷酸相似度为 99.1%~100.0%;遗传进化分析显示 SX-2018 株属于 CladeⅡ分支。设计针对 VP1 基因的特异性引物
(209 bp)并构建其相应的质粒标准品,以不同浓度的该质粒标准品为模板扩增并绘制了标准曲线,通过条件优化
建立了 APV SYBR Green 荧光定量 PCR 检测方法。结果显示:建立的荧光定量 PCR 方法仅特异性扩增 APV,与鹦
鹉其它常见病毒无交叉反应,特异性强;对质粒标准品检测的最低浓度达 5.4×101 拷贝/μL,为常规 PCR 的 100
倍;组内组间变异系数分别小于0.5%、1.5%,重复性好。利用该方法与常规PCR方法对疑似APV感染的30份样
品进行检测并比较,结果显示:建立的 APV SYBR Green 荧光定量 PCR 检测方法与常规 PCR 的符合率为 86.67%,
且阳性检出率高于常规 PCR。本研究为我国鹦鹉 APV 的分子流行病学调查提供了参考数据,为在鹦鹉群中开展
该病的筛查提供了有效的技术手段。
关键词:禽多瘤病毒;荧光定量PCR;检测;鹦鹉
中图分类号:S858.93 文献标识码:A 文章编号: